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首页 > 中国实验诊断学 > HSP65-PEAⅠ融合蛋白表达纯化及免疫效果研究

HSP65-PEAⅠ融合蛋白表达纯化及免疫效果研究

Study on the expression,purification and immune efficacy of fusion protein HSP65-PEAⅠ

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摘要目的：通过基因工程手段在大肠杆菌中表达并纯化融合蛋白 HSP65-PEAⅠ，建立小鼠实验模型，检测其抗体效价水平，初步评价免疫效果。方法扩增 HSP65-PEAⅠ片段插入表达载体 pET-28a 中，转化 E．coli BL21（DE3），IPTG 诱导表达，优化纯化条件，以 HSP65-PEAⅠ为免疫原对小鼠进行免疫接种。结果双酶切和测序鉴定结果证实 HSP65-PEAⅠ成功克隆入 pET-28a 载体中，表达的重组蛋白相对分子量约为97000，主要以包涵体形式表达，纯化后的重组蛋白纯度达90％，浓度为0．498 mg／ml。免疫小鼠均在首免1周后采集的血清中检测到特异性抗体，抗体效价水平持续增长且在42天均达到了210。结论成功在 E．coli 中表达并经过纯化得到重组蛋白 HSP65-PEAⅠ，确定了动物免疫程序，为制备抗烧烫伤多器官衰竭疫苗奠定了基础。

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作者 何苗 [1] 张国利 [2] 陈萍 [3] 田园 [2] 岳玉环 [2] 吴广谋 [2] 于佳 [4] 史飞 [4] 侯天全 [2] 学术成果认领
作者单位 吉林农业大学食品科学与工程学院，吉林 长春 130118; 军事医学科学院军事兽医研究所，吉林 长春 130122; 吉林省人兽共患预防与控制重点实验室 省部共建重点实验室，吉林 长春 130122 [1] 军事医学科学院军事兽医研究所，吉林 长春 130122; 吉林省人兽共患预防与控制重点实验室 省部共建重点实验室，吉林 长春 130122 [2] 吉林农业大学食品科学与工程学院,吉林 长春,130118 [3] 吉林农业大学食品科学与工程学院，吉林 长春 130118; 军事医学科学院军事兽医研究所，吉林 长春 130122 [4]
关键词 热休克蛋白65绿脓杆菌外毒素A基因克隆表达纯化HSP65PEAⅠGene cloneExpressionPurification
医学主题词 蛋白(Egg White)免疫(Immunity)基因(Genes)研究(Research)热温度(Hot Temperature)
分类号 R392（医学免疫学）
栏目名称
实验研究
发布时间 2015-06-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
军队后勤科研项目（CWS11J091）
  • 浏览164
  • 被引3
  • 下载9
中国实验诊断学

中国实验诊断学

2015年5期

700-704页

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