换一批荧光定量PCR技术在食源性疾病病原菌快速检测上的应用与评估
Expanded application and evaluation of fluorescent quantative PCR in rapid detection of food- borne pathogenic bacteria
摘要目的:应用荧光定量PCR技术,实现对食源性疾病病原菌的快速检测.方法:选取食源性疾病常见的四种病原菌,沙门菌、志贺菌、副溶血性弧菌和金黄色葡萄球菌,根据它们的基因保守区设计特异性引物和Taqman探针,建立荧光定量PCR技术,同时验证方法的敏感性和特异性,并与普通PCR、常规培养法进行比较.结果:用荧光定量PCR技术检测沙门菌、志贺菌、副溶血性弧菌和金黄色葡萄球菌的检测灵敏度可达4 CFU/ml～8 CFU/ml,其敏感性比普通PCR高10倍,比常规培养法高1000倍.且快速简便,特异性强,从核酸提取至完成检测最快能在2h～3h内完成,而常规培养需3d～4d.通过对282件样品的检测,证实该方法可以使阳性检出率从常规法的8.51％提高至14.18％.结论:建立的荧光定量PCR技术特异性强,敏感性高,操作简便快速,适用于食源性疾病病原菌的快速检测.
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