烧伤前后大鼠血清对骨髓基质细胞生物学行为的影响
Effects of serum from normal and burned rats on the biological behavior of bone marrow stromal cells
目的:观察烧伤前后大鼠血清对体外培养的大鼠骨髓基质细胞(BMSCs)的生物学行为的影响,为BMSCs在创伤修复中的应用奠定实验基础.方法:取Wistar大鼠,处死,分离骨髓,原代培养BMSCs,传代后分别用含有体积分数为10%的胎牛血清(FCS,F组)、正常大鼠血清(N组)、烧伤后3 d大鼠血清(B1组)和烧伤后14 d大鼠血清(B2组)的F-12培养基培养,用噻唑蓝(MTT)法测定其生长曲线,碘化丙啶(PI)染色,流式细胞仪分析细胞周期、DNA含量和细胞凋亡率.结果:用含有10%大鼠血清的F-12培养基传代培养的细胞生长曲线相似,但与含有FCS的F-12培养基传代培养的明显不同,前者倍增时间缩短,N组、B1组、B2组细胞群体倍增时间分别为23.7 h、18.6 h和20.2 h,且平台期所能达到的细胞总数明显增加.烧伤后大鼠血清处理的细胞中G0/G1期细胞比例明显低于其他两组(P均<0.01),而S期细胞的比例则相反(P<0.01).大鼠血清处理的细胞中DNA含量明显高于FCS培养的细胞(P<0.05或P<0.01),而烧伤后的大鼠血清处理的细胞中DNA含量又明显高于正常大鼠血清处理的细胞(P<0.01).烧伤后3 d的大鼠血清处理的细胞的凋亡率比其他组细胞明显升高(P<0.01).结论:大鼠血清比胎牛血清能更好地促进大鼠体外培养的BMSCs生长;烧伤大鼠血清内可能含有多种能影响BMSCs生长的物质,且其含量随烧伤的时间改变而变化,对BMSCs生长的影响是复杂的.
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