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细菌细胞壁人髓系细胞触发受体-1天然配体的研究

Study on the natural ligand(s) of triggering receptor expressed on myeloid cell-1 on bacteria cell wall

摘要:

目的 寻找人髓系细胞触发受体-1(TREM-1)的天然配体,为阐明脓毒症的发病机制提供理论依据.方法 分离人外周血中性粒细胞和单核细胞进行原代培养.在两种分离培养的细胞中分别加入热失活的金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、结核分枝杆菌或高渗诱导金黄色葡萄球菌L型、铜绿假单胞菌L型处理24 h.在两种分离培养的细胞中分别加入超声提取的金黄色葡萄球菌细胞壁、铜绿假单胞菌细胞壁或结核分枝杆菌细胞壁处理24 h.在两种分离培养的细胞中分别加入各细胞壁三大组分(细胞壁多糖、细胞壁脂类、细胞壁蛋白)处理24 h.用荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测各处理组细胞TREM-1 mRNA水平,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测各处理组细胞培养上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)浓度.结果 金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌的菌体、细胞壁和细胞壁多糖处理后中性粒细胞和单核细胞TREM-1mRNA水平以及细胞培养上清液中TNF-α和IL-1β浓度均明显升高.与空白对照组相比,金黄色葡萄球菌细胞壁多糖处理后中性粒细胞TREM-1 mRNA水平增加了(3.86±0.20)倍,单核细胞TREM-1 mRNA水平增加了(5.15±0.56)倍(均P<0.05);铜绿假单胞菌细胞壁多糖处理后中性粒细胞TREM-1 mRNA水平增加了(4.03±0.15)倍,单核细胞TREM-1 mRNA水平增加了(7.22±0.73)倍(均P<0.05).加入能竞争性结合TREM-1配体的LP17可以削弱此效应;而结核分枝杆菌的菌体、细胞壁和细胞壁组分均无此效应.结论 人TREM-1天然配体位于金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌的细胞壁上,成分可能为细菌细胞壁多糖.

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