应用巢氏PCR-RFLP直接检测结核病临床标本中结核分支杆菌链霉素耐药基因型
detction of Streptomycin-resistant Genotype in Mycobacterium Tuberculosis from Clinical Samples by Nested PCR-RFLP
目的:了解结核分支杆菌链霉素耐药基因突变情况,建立快速检测耐药突变株的方法.方法:通过PCR-SSCP、PCR-RFLP和巢氏PCR-RFLP分析40株结核分支杆菌临床分离株和15例临床标本的rpsL基因突变的部位和性质.结果:10株药物敏感株的rpsL双链泳动正常、并可被MboⅡ消化;30株耐SM分离株中,25株双链泳动异常,24株不被消化;15例临床标本中,常规PCR扩增7例rpsL阳性,巢氏PCR 15例均阳性,4例rpsL双链泳动异常、并不被MboⅡ消化.结论:通过常规PCR-SSCP和PCR-RFLP可快速检测结核分支杆菌耐SM分离株43位密码子点突变,而通过巢氏PCR-RFLP可直接检测大多数临床标本中结核分支杆菌SM耐药基因型.
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