肝细胞生长因子诱导人骨髓来源的多能成体祖细胞向肝样细胞分化的可行性
Investigation possibility of multipotent adult progenitor cells from human bone marrow differentiating into hepatocytes in vitro
摘要目的探索人骨髓来源多能成体祖细胞(multipotent adult progenitor cells from human bone marrow,hMAPCs)在一定诱导条件下分化为肝细胞的可行性,为肝组织工程提供新的种子细胞来源.方法分组:A组:(hepatocyte growth factor,HGF)20 ng/mL诱导;B组(阳性对照组):L-02人肝细胞株;C组(阴性对照组):未加任何诱导因素的MAPCs.免疫细胞化学鉴定不同诱导分化阶段细胞的白蛋白(albumin,ALB)、甲胎蛋白(alpha fetoprotein,AFP)、细胞角蛋白18(cytokeratin 18,CK-18)、细胞角蛋白19(cytokeratin 19,CK-19)等肝细胞特征的表型变化并计数阳性细胞比率;Western blot检测诱导分化第21、35天后细胞的ALB的表达.结果免疫细胞化学结果:ALB、CK-18在不同时间段基本为阳性着色;CK-19在各组均为阴性着色,AFP作为早期不成熟肝细胞的一个标志,仅在诱导第7天为阳性着色;Western blot检测结果:在诱导分化第21、35天,ALB均有阳性表达.结论hMAPCs在一定诱导条件下具有向肝样细胞分化的潜能.
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