恢复野生型PTEN基因表达对炎性乳腺癌MDA-MB-468体外生物学行为的影响
In vitro study of the effects of wild-type PIEN gene expression on the biological behavior of MDA-MB-468 inflammatory breast cancer cell Line
目的 研究野生型PrEN基因转染对人炎性乳腺癌MDA-MB-468细胞体外生物学行为的影响及机制.方法 应用基因重组技术构建重组质粒pcDNA3.1-PTEN,用脂质体转染乳腺癌细胞株MDA-MB-468,用RT-PCR、免疫组化及免疫印迹方法分析目的基因及其蛋白表达,并用免疫印迹方法检测转染后,在表皮生长因子的诱导下,磷酸化蛋白激酶B(PKB/Akt)的表达,四甲基唑蓝(MTT)法分析细胞增殖,Annexin V-FITC和PI双染流式细胞术检测细胞凋亡.结果 RT-PCR、免疫组化及免疫印迹显示pcDNA3.1-PTEN转染组有PTENmRNA及其蛋白表达,且显示转染组在表皮生长因子的诱导下,p-Akt蛋白表达下调.MTT检测表明pcDNA3.1-PTEN转染组活细胞数较其它各组均低(P<0.01),流式细胞分析其凋亡率达21.68%.结论 野生型PTEN基因依赖其磷酸酶活性可诱导乳腺癌MDA-MB-468细胞凋亡.
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