丝裂霉素C与C2-神经酰胺协同抑制人膀胱癌细胞生长及其机制的研究

Research about synergetic effect and its mechanism of combining mitomycin C with C2_ceramide in inhibiting growth of human bladder cancer cells

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摘要目的评价丝裂霉素C与C2-神经酰胺联合应用对人膀胱癌细胞的作用效果,并探讨其机制.方法不同浓度丝裂霉素C与C2-神经酰胺单独及联合作用于人膀胱癌BIU-87细胞后,应用噻唑蓝(MTT)法检测药物细胞毒性,通过计算合用指数(CI)分析协同作用,流式细胞术(FCM)检测BIU-87细胞凋亡率,吖啶橙(AO)荧光染色观察凋亡形态学变化,Western blot检测细胞色素C在细胞内分布变化,并检测半胱天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)活性改变.结果单独应用时丝裂霉素C与C2-神经酰胺的中效浓度分别是159μmol/L和28μmol/L,联合用药时下降为55 μmol/L和11 μmol/L,CI=0.74.丝裂霉素C与C2-神经酰胺单独及联合应用均可导致BIU-87细胞出现凋亡的形态学变化.两种药物联合应用时的凋亡率高于各自单用(P＜0.05).线粒体细胞色素C含量在丝裂霉素C与C2-神经酰胺单独及联合应用时均较对照组减少,联合用药时减少最为明显,细胞浆内细胞色素C含量在联合用药时增加也最为明显(P＜0.05).Caspase-3活性在丝裂霉素C与C2-神经酰胺单独及联合应用时均较对照组升高,联合用药时升高最为明显(P＜0.05).结论丝裂霉素C与C2-神经酰胺联合应用可以通过共同诱导细胞凋亡,协同抑制膀胱癌细胞生长.线粒体细胞色素C释放和Caspase-3活性变化可能发挥重要作用.