用镭射激光捕获技术研究LEC鼠P53基因突变和肝癌发生的关系

Use of laser capture microdissection (LCM) to study the relationship between P53 mutation of LEC rats and hepatocarcinogenesis

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摘要目的研究P53基因突变与原发性肝癌发生发展的关系.方法利用LEC鼠(long evan cinnamon)作为肝癌的动物模型.选取15周,37周,101周的LEC鼠15,14和10只,正常对照SD大鼠15只,取出肝脏组织进行切片.切片一部份用于GST-P免疫组化(immunohistochemistry,IHC)染色,另一部份利用镭射激光捕获技术(laser capture microdissection,LCM)定位切割,进行P53基因外显子5,6/7,8突变的分析.结果 37周龄LEC鼠和101周龄LEC鼠GST-P阳性率高于对照组(P＜0.005),15周龄LEC鼠GST-P阳性率与对照组相比差异无统计学意义(P＞0.05).P53基因在GST-P表达阳性肝炎组有3例突变(3/11),GST-P表达阳性肝癌组有10例发生突变(10/15),肝癌组显著高于肝炎组(P＜0.05).结论 P53的突变发生在肝癌形成的早期阶段,随着发展过程,突变率明显增高.GST-P虽然特异性不强,但是不失为一种灵敏的判断肝损伤的指标.