Survivin基因诱饵表达载体的构建和鉴定-论文-万方医学网

Survivin基因诱饵表达载体的构建和鉴定

Construction and identification of bait expression vector of Survivin gene

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摘要：

目的构建Survivin基因诱饵表达载体,为建立酵母双杂交系统筛选Survivin蛋白靶蛋白奠定基础.方法从人K562细胞中提取总RNA作为模板,逆转录得到Survivin cDNA,通过特异引物扩增Survivin基因的ORF区,然后与诱饵表达载体pGBKT7连接,构建诱饵表达载体pGBKT7-Survivin,再把构建好的诱饵载体pGBKT7-Survivin转化到酵母AH109细胞中,并用Western blot分析诱饵蛋白的表达情况.同时检测诱饵蛋白的毒性和自激活作用.结果成功扩增了Survivin基因的ORF区,并成功将其克隆到诱饵表达载体pGBKT7中,测序结果正确.诱饵载体成功转化到酵母AH109细胞中,无毒性和自激活作用,Western blot分析证实了酵母细胞高表达诱饵蛋白.结论成功构建了Survivin基因的ORF区的酵母诱饵表达载体,为建立酵母双杂交系统筛选Survivin蛋白靶蛋白奠定基础.

作者：钟梁 ^[1] 郝坡 ^[1] 刘北忠 ^[1] 王东生 ^[1] 刘畅 ^[1] 金丹婷 ^[1] 王翀 ^[1] 王春光 ^[1]

作者单位：重庆医科大学临床检验诊断学教育部重点实验室,重庆,400016 ^[1]

期刊：《中国现代医学杂志》2008年18卷22期 3254-3257,3261页 ISTICPKU

关键词： Survivin基因诱饵载体诱饵蛋白

主题词：基因(Genes)蛋白(Egg White)细胞(Cells)目的(Goals)方法(Methods)

分类号： R733.73

栏目名称：论著

DOI： 10.3969/j.issn.1005-8982.2008.22.006

发布时间： 2009-02-18

基金项目：

国家自然科学基金 国家中医药管理局项目

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