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Hyper-IL-6重组腺病毒的制备

Generating of recombinant adenovirus vector containing Hyper-IL-6(AdHIL-6)

摘要:

目的 探讨大量制备高滴度重组腺病毒的方法 .方法 以Pac-1酶切Hyper-IL-6重组腺病毒(AdHIL-6)质粒,乙醇沉淀回收DNA,将线性化的AdHIL-6质粒经脂质体转染293细胞进行病毒的包装扩增,以氯化铯密度梯度离心法纯化重组腺病毒,根据GFP(绿色荧光蛋白)计数法和有限稀释法原理测定病毒滴度及感染293细胞、L02细胞的MOI(Multiplicity of infection,感染复数),并以免疫细胞化学检测感染L02细胞后目的 蛋白Hyper-lL-6的表达.结果 收集的病毒液经PCIL扩增出目的 条带,测得病毒滴度为1.6×109pfu/mL,AdHIL-6感染293细胞、L02细胞的MO1分别是7和54,感染L02细胞后Hyper-IL-6强阳性表达.结论 成功地完成了Hyper-IL-6重组腺病毒的制备,为后续的腺病毒载体介导的基因治疗奠定了基础.

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作者: 王传敏 [1] 郄春花 [2] 秦波 [1]
期刊: 《中国现代医学杂志》2009年19卷7期 1003-1006页 ISTICPKU
分类号: R.511.8
栏目名称: 论著
DOI: 10.3969/j.issn.1005-8982.2009.07.012
发布时间: 2009-05-22
基金项目:
重庆市自然科学基金
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