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RNA靶向干扰DcR3促进人肝癌HepG2细胞凋亡及机制研究

Apoptosis of hepatoma cells line HepG2 induced by DcR3 siRNA and its mechanism

摘要:

目的 研究靶向干扰DcR3基因对人肝癌HepG2细胞凋亡的影响并探讨其可能的分子机制.方法 设计并合成DcR3基因的特异性DcR3 siRNA(实验组)和非特异性DcR3 siRNA(对照组),在脂质体介导下分别转染HepG2细胞株.Western blot检测两组DcR3 siRNA转染HepG2细胞24和48 h后DcR3蛋白表达水平;MTT法检测转染48 h细胞生长增殖;流式细胞术、DNA琼脂糖凝胶电泳检测转染24 h细胞凋亡;免疫组化法检测转染24 h细胞caspase3蛋白的表达.结果 实验组细胞24和48 h DcR3蛋白相对表达水平分别为(0.532±0.051)和(0.417±0.044);对照组分别为(1.978±0.246)和(2.018±0.275);两组比较,相同时间点相对表达水平差异有显著性(P<0.05);实验组24和48h DcR3蛋白相对表达水平比较差异有显著性(P<0.05),对照组差异无显著性(P>0.05).两组细胞转染48 h抑制率分别为(59.8±5.4)%和(0.8±0 1)%,两者比较差异有显著性(P<0.05);两组细胞转染24 h凋亡率分别为(19.7±32)%和(6.9±0.8)%,两者比较差异有显著性(P<0.05);转染24 h后两组caspase3蛋白阳性率分别为72.8%和38.9%,平均光密度值分别为(0.41±0.06)和(0.21±0.03),两者比较差异有显著性(P<0.05).结论 特异性DcR3 siRNA有抑制人肝癌HepG2细胞DcR3蛋白表达、细胞增殖和诱导凋亡的作用,其机制可能与上调caspase 3的表达有关.

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作者: 黄秋林 [1] 曹超 [1] 雷俊悦 [1] 刘璇 [1]
分类号: R394.3
栏目名称: 论著
DOI: 10.3969/j.issn.1005-8982.2012.13.009
发布时间: 2012-10-29
基金项目:
湖南省科技厅计划立项项目 湖南省自然科学基金
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