换一批
换一批人SUMO-2 shRNA干扰表达载体构建及其对细胞增殖的影响
Construction of SUMO-2 shRNA knockdown vector and its effect on cell proliferation
摘要目的 构建干扰人SUMO-2表达的shRNA重组质粒载体,并筛选下调人SUMO-2表达的稳定细胞株.方法 设计并合成针对人SUMO-2的shRNA寡核苷酸,并将其克隆至pLKO.1质粒载体上,转染HCT116细胞后经嘌呤霉素筛选获稳定表达细胞株,并通过免疫印迹鉴定SUMO-2的表达.结果 成功构建干扰人SUMO-2表达的pLKO.1质粒载体,可在HCT116细胞中稳定表达,且能有效抑制SUMO-2蛋白质的表达.功能研究初步证明干扰SUMO-2表达可抑制细胞增殖并使处于细胞周期G1期的细胞比例上升.结论 获得了干扰人SUMO-2表达的pLKO.1-shRNA质粒载体,以及下调SUMO-2表达的HCT116稳定细胞株.
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关键词
shRNA干扰SUMO-2下调稳定细胞株细胞增殖细胞周期shRNA interferingSUMO-2knockdownstable cell linecell proliferationcell cycle
分类号
Q291
栏目名称
发布时间
2016-01-23
基金项目
创伤烧伤与复合伤国家重点实验室基金（SKLZZ200907）；
国家自然科学基金（30970651）
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