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内皮抑素30肽对HepG2细胞黏附、侵袭能力影响的机制研究

Endostatin 30 peptide inhibit the cell adhesion and invasion of HepG2 cells

摘要:

目的:探讨RGD修饰的人内皮抑素30肽对HepG2细胞黏附、侵袭的影响及作用机制。方法人工合成人内皮抑素1~30位氨基酸(30肽,序列25~31由RGIRGAD改为RGDRGD)所对应的核苷酸序列,连接到质粒pTYB2中,再转化至大肠埃希菌BL21(DE3)中表达,同法合成人内皮抑素1~27位氨基酸构成的27肽作为对照。细胞黏附实验及Transwell实验分别检测30肽和27肽对HepG2细胞黏附能力和侵袭能力的影响,同时筛选与侵袭作用相关的整合素;免疫荧光检测30肽和27肽对αvβ3整合素的聚集作用,流式细胞仪检测30肽和27肽对HepG2细胞表面相应整合素表达的影响;逆转录-聚合酶链反应(RT- PCR)及Western blot检测30肽和27肽对HepG2细胞TIMP1和TIMP2 mRNA和蛋白质表达量的影响。结果30肽能明显抑制HepG2细胞黏附、侵袭,对侵袭作用的影响与整合素αvβ3相关,同时,30肽能上调HepG2细胞中TIMP1和TIMP2 mRNA及蛋白质的表达,30肽加αvβ3抗体后,上述作用明显增强。结论30肽可能是通过整合素αvβ3发挥其抗肿瘤侵袭转移作用,可以成为临床上肝癌的辅助化疗药物发挥作用。

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作者: 郭红艳 [1] 刘秀财 [1] 李淑艳 [1]
分类号: R735
栏目名称: 论著
DOI: 10.3969/j.issn.1005-8982.2016.04.003
发布时间: 2016-04-21
  • 浏览:63
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