划痕损伤对大鼠大脑皮层微血管内皮细胞NF-κB表达及继发性死亡的影响

Effects of scratching damage on NF-κB expression in brain microvascular endothelial cells and secondary death of rats

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摘要目的：通过体外培养SD大鼠大脑皮层微血管内皮细胞并制作划痕损伤模型，观察划痕损伤对脑微血管内皮细胞NF-κB表达及其自噬、凋亡和坏死的影响。方法体外培养SD大鼠大脑皮层微血管内皮细胞并制作划痕损伤模型，应用NF-κB抑制剂吡咯醛二硫氨基甲酸（PDTC）干预划痕损伤脑微血管内皮细胞。随机分为对照组、单纯损伤组、损伤+抑制组，在不同时间点（损伤后1、6、12、24及48 h）分别应用免疫荧光细胞化学法测定磷酸化NF-κB p65蛋白的表达，Annexin V/PI染色法检测凋亡、坏死，Western blot检测自噬蛋白LC3Ⅱ表达情况。对照组为无划痕损伤的脑微血管内皮细胞。结果脑微血管内皮细胞划痕损伤后NF-κB蛋白表达于伤后1 h开始表达增强，于24 h达高峰，与对照组比较差异有统计学意义（<0.05）。凋亡、坏死及自噬各指标均随时间推移有不同程度升高，与对照组比较差异有统计学意义（<0.05）。而经PDTC处理后上述变化均受不同程度的抑制，与单纯损伤组相比差异有统计学意义（<0.05）。结论划痕损伤后可激活脑微血管内皮细胞NF-κB表达，同时可引起脑微血管内皮细胞的自噬、凋亡和坏死。