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PCR-RLFP方法检测eNOS G894T多态性实验条件研究

Experimental condition research of PCR-RLFP in detection of polymorphism of eNOS G894T

摘要:

目的:探讨聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测内皮细胞型一氧化氮合酶(eNOS) G894T多态性的最佳实验条件。方法对PCR和RFLP的一些影响因素进行研究。结果 PCR扩增eNOS基因的最佳条件为:20μmol/L的引物浓度;5.0 U的Taq酶量;112μmol/L的dNTP浓度。20μl体系中加4μl产物,5.0 U的酶消化4 h为最经济有效的酶切体系。结论最佳的实验条件的探索是进行大批量实验研究的关键。

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