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HMGB1对缺氧复氧心肌细胞氧化损伤的影响研究

Effect of HMGB1 on oxidative damage of hypoxic reoxygenation cardiomyocytes

摘要:

目的 研究高迁移率蛋白1(HMGB1)对缺氧复氧心肌细胞氧化损伤的影响.方法 构建H9C2细胞缺氧复氧损伤模型,ELISA法检测培养液上清中HMGB1水平,qRT-PCR检测细胞中HMGB1基因的转录水平.在H9C2细胞中转染HMGB1 siRNA后进行缺氧复氧处理,硫代巴比妥酸比色法检测细胞中丙二醛(MDA)含量,黄嘌呤氧化法检测细胞中超氧化物歧化酶(SOD)含量,二硝基苯肼显色法检测上清中乳酸脱氢酶(LDH)含量,流式细胞术测定细胞凋亡情况,Western blot测定细胞中剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)、Bc1-2相关X蛋白(Bax)、剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9(Cleaved Caspase-9)蛋白水平.结果 缺氧复氧后H9C2细胞中HMGB1转录水平升高,细胞分泌的HMGB1水平也升高,与正常培养的细胞相比,差异具有统计学意义(P<0.05);细胞中转染HMGB1 siRNA后可以明显抑制HMGB1的转录和合成;敲低HMGB1可以降低缺氧复氧后的H9C2细胞中MDA水平,促进细胞中SOD合成,减少细胞释放LDH,降低细胞凋亡水平,减少Caspase-3、Caspase-9活化,促进Bax的表达,与单纯缺氧复氧的心肌细胞相比,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 缺氧复氧诱导心肌细胞合成HMGB1,敲低HMGB1可以减弱缺氧复氧诱导的心肌细胞凋亡,减轻氧化损伤.

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作者: 邓秋菊 [1] 李慧颖 [2] 向琳 [3]
作者单位: 重庆市永川中医院心内科,重庆,402160 [1] 北京第三一六医院保健室,北京,100091 [2] 重庆市永川人民医院心血管内科,重庆,402160 [3]
分类号: R542.2
栏目名称: 论著
DOI: 10.3969/j.issn.1674-4055.2018.08.23
发布时间: 2018-12-07
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