HPLC法测定不同产地地龙中尿嘧啶、次黄嘌呤、尿苷、肌苷的含量
Determination of Uracil, Hypoxantine, Uridine and Inosine in Earthworm from Different Habitats by HPLC
目的:测定不同产地、品种的地龙药材中尿嘧啶、次黄嘌呤、尿苷、肌苷的含量,建立地龙质量控制的客观指标.方法:用0.9%生理盐水超声提取地龙药材,采用反相高效液相色谱法,Waters Symmetry C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5 μm),以0.01 mol·L-1磷酸二氢钾溶液和50%甲醇为流动相,流速为0.8 ml·min-1,梯度洗脱,检测波长254 nm,柱温27℃,同时测定尿嘧啶、次黄嘌呤、尿苷、肌苷等4种成分的含量.结果:尿嘧啶的线性范围为0.75~24.00μg·ml-1(r=0.999 3),平均回收率99.82%,RSD=2.34%(n=6);次黄嘌呤的线性范围2.50~80.00μg·ml-1(r=0.999 2),平均回收率101.93%,RSD=1.45%(n=6);尿苷的线性范围1.25~40.00μg·ml-1(r=O.999 2),平均回收率97.53%,RSD=1.73%(n=6);肌苷的线性范围5.00~160.00μg·ml-1(r=0.999 1),平均回收率102.06%,RSD=2.44%(n=6).结论:该方法重复性,回收率好,可用于地龙药材中尿嘧啶等4种成分的含量测定.
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