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舒芬太尼后处理对2型糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响及其与PI3K-Akt通路的关系

The Effect on TypeⅡDiabetes Mellitus of the Myocardial Ischemia-Reperfusion Injury by Sufentanil Postconditioning in Rats and its Relation with PI3K-Akt Pathway

摘要:

目的:研究舒芬太尼后处理对2型糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响及其与磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)-蛋白激酶B(Akt)通路的关系。方法:健康雄性SD大鼠24只,体重180~200 g,采用随机数字表法将其随机分为四组(n=6):非糖尿病假手术组(NDM-S组)、非糖尿病缺血再灌注组(NDM-I/R组)、非糖尿病舒芬太尼后处理组(NDM-SP组)、非糖尿病舒芬太尼后处理+渥曼青霉素(PI3K抑制剂)组(NDM-SP+W组)。另取健康雄性SD大鼠,采用高糖高脂饮食喂养6周诱导胰岛素抵抗+腹腔注射链脲佐菌素35 mg/kg的方法制备2型糖尿病模型(血糖≥16.7 mmol/L),选取造模成功的大鼠24只,继续高糖高脂喂养2周后采取随机数字表法,将其分为四组(n=6):糖尿病假手术组(DM-S组)、糖尿病缺血再灌注组(DM-I/R组)、糖尿病舒芬太尼后处理组(DM-SP组)、糖尿病舒芬太尼后处理+渥曼青霉素组(DM-SP+W组)。采用左冠状动脉前降支下穿线或结扎,阻断30 min,再灌注120 min的方法制备大鼠心肌缺血再灌注的模型。其中假手术组只穿线不结扎;缺血再灌注组穿线后稳定5 min,阻断30 min,再灌注120 min;舒芬太尼后处理组于再灌注前5 min经舌下静脉注射舒芬太尼1.0μg/kg;舒芬太尼后处理+渥曼青霉素组于再灌注前5 min经舌下静脉注射渥曼青霉素15μg/kg和舒芬太尼1.0μg/kg。再灌注120 min后取血样,测定肌钙蛋白cTnI的浓度;处死后收集心肌组织,采用TUNEL法测定心肌细胞的凋亡指数(AI),采用Western blot法检测心肌组织Akt、p-Akt的表达水平。结果:非糖尿病和糖尿病大鼠I/R组、SP组、SP+W组与S组相比较,血浆cTnI的浓度升高、AI增加、p-Akt的表达增加(P<0.05)。舒芬太尼后处理可明显减轻NDM组的心肌缺血再灌注损伤,使升高的cTnI浓度降低、AI降低、p-Akt的表达增加(P<0.05),而对DM组心肌缺血再灌注损伤的各项指标均无明显的影响。NDM-SP组的血浆cTnI的浓度、AI明显低于DM-SP组而p-Akt的表达高于DM-SP组。结论:舒芬太尼后处理对2型糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤没有保护作用,PI3K-Akt通路不参与该过程。

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