疏风宣肺解毒方药对流感病毒性肺炎小鼠Janus激酶信号转导与转录激活因子通路的影响

Effects of Shufengxuanfeijiedu formula on Janus kinase signal transducer and transcription activator pathway in mice with influenza viral pneumonia

摘要:

目的:观察疏风宣肺解毒方对流感病毒性肺炎小鼠肺组织Janus激酶信号转导与转录激活因子(JAK-STAT)通路的调控作用。方法将60只小鼠按随机数字表法分为正常组、模型组、达菲对照组和疏风宣肺方高、中、低剂量组,每组10只。应用0.05 mL的4LD50流感病毒肺适应株FM1滴鼻感染小鼠,建立小鼠流感病毒性肺炎模型;正常组以0.05 mL生理盐水滴鼻。制模成功2 h后,正常组、模型组灌服蒸馏水;达菲对照组灌服达菲(磷酸奥司他韦)2.5 g·mL-1·d-1;疏风宣肺方高、中、低剂量组分别灌服疏风宣肺解毒方药(由菊花、桑叶、杏仁、桔梗、连翘、柴胡等组成,颗粒剂),按照人与小鼠体表面积换算给药剂量,以加倍量为高剂量,折半量为低剂量,每日1次,每次0.2 mL。连续给药4 d后取小鼠肺组织,采用基因芯片技术检测小鼠JAK-STAT通路相关差异基因的表达,筛选差异表达基因的标准为:上调基因P<0.05,且log2比值>1,下调基因P<0.05,且log2比值<-1。应用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应(RT-qPCR)测定肺组织Janus激酶(JAK)、γ干扰素(IFN-γ)的mRNA表达水平。结果与正常组比较,模型组差异表达基因STAT5〔log2(正常组/模型组)=2.32〕、白细胞介素-4受体亚单位〔IL4RA,log2(正常组/模型组)=4.77〕、白细胞介素-12受体〔IL12R, log2(正常组/模型组)=1.58〕、 JAK〔log2(正常组/模型组)=2.41〕均明显上调,干扰素(IFN)明显下调〔log2(正常组/模型组)=-1.45〕;与模型组比较,达菲对照组〔log2(达菲对照组/模型组)=1.51〕、方药各组〔log2(方药低剂量组/模型组)=1.46,log2(方药中剂量组/模型组)=1.72,log2(方药高剂量组/模型组)=1.40〕差异表达基因IFN明显上调,STAT5〔log2(达菲对照组/模型组)=-2.06,log2(方药低剂量组/模型组)=-1.41, log2(方药中剂量组/模型组)=-2.10,log2(方药高剂量组/模型组)=-1.89〕、IL4RA〔log2(达菲对照组/模型组)=-2.52,log2(方药低剂量组/模型组)=-1.85,log2(方药中剂量组/模型组)=-2.74,log2(方药高剂量组/模型组)=-1.39〕、IL12R〔log2(达菲对照组/模型组)=-1.48,log2(方药低剂量组/模型组)=-0.10,log2(方药中剂量组/模型组)=-1.58,log2(方药高剂量组/模型组)=-0.53〕、JAK〔log2(达菲对照组/模型组)=-1.44, log2(方药低剂量组/模型组)=-0.88,log2(方药中剂量组/模型组)=-1.74,log2(方药高剂量组/模型组)=-0.53〕明显下调,模型组JAK mRNA表达较对照组明显升高(2-ΔΔCt:3.17±0.94比1.01±0.13,P<0.05), IFN-γ mRNA表达较对照组明显降低(2-ΔΔCt:0.15±0.48比1.01±0.12,P<0.05);与模型组比较,达菲对照组和疏风宣肺方高、中剂量组JAK mRNA表达均明显降低(2-ΔΔCt:2.02±0.63、1.19±0.30、1.59±0.67比3.17±0.94,均P<0.05),达菲对照组和疏风宣肺方高、中、低剂量组IFN-γ mRNA表达升高(2-ΔΔCt:0.61±0.12、0.41±0.13、0.85±0.14、0.78±0.20比0.15±0.48,均P<0.05)。结论疏风宣肺解毒方可通过调节JAK-STAT通路和升高IFN-γ水平,调节辅助性T细胞1/2(Th1/2)的平衡,减轻肺组织免疫病理损伤。

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