B细胞非霍奇金淋巴瘤IgH基因重排检测及凝胶扫描技术应用的初步研究

Detection of IgH gene rearrangement in B-cell non-Hodgkin's lymphoma and application of gel-scan method

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摘要目的采用凝胶扫描技术,力求对采用聚合酶链反应(PCR)检测非霍奇金淋巴瘤(NHL)抗原受体基因重排结果分析时建立量化标准,以利于临床医师应用时客观判断,并为其筛选随访病例提供依据.方法用PCR 对96例B-NHL分别采用IgH FR3A及FR2A检测IgH基因克隆性重排.65例经IgH FR3APCR已证实为IgH基因克隆性重排B-NHL及8例良性病变淋巴组织和5例正常人外周血单核细胞,IgHFR3A PCR产物8%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳银染后图像行凝胶扫描,绘制曲线并计算h1/h2比值.结果 (1)采用FR3A引物,克隆性IgH基因重排在96例B-NHL中检测率为68%,采用FR2A引物,检测率为61%,结合FR3A、FR2A引物,总检测率为83%.(2)凝胶扫描曲线示65例B-NHL的h1/h2均??3,而5例正常人外周血单核细胞曲线均表现为钟型,8例良性病变淋巴组织h1/h2比值均<1.5.结论非霍奇金淋巴瘤抗原受体基因重排检测的凝胶扫描分析曲线中,h1/h2峰高比值至少>3可提示为IgH基因克隆性重排,<1.5可能提示IgH基因多克隆重排.比值介于1.5和3之间,提示有随访意义.联合FR3A,FR2A引物,可提高B-NHL IgH基因克隆性重排的检测率.