换一批人乳头瘤病毒阴性的喉鳞癌细胞系的建立
Establishment of a HPV-negative cell line derived from xenografted human laryngeal squamous cell carcinoma
摘要目的建立1株人乳头状瘤病毒(HPV)阴性的喉鳞状细胞癌细胞系,为体外研究喉癌提供理想的实验模型.方法以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)证实为HPV阴性的高分化喉鳞癌手术切除标本接种于裸鼠皮下,取连续传代2次的裸鼠皮下移植瘤进行体外原代培养.通过光镜、电镜、生长曲线、细胞周期时相、软琼脂克隆实验、异种移植成瘤实验、角蛋白、癌胚抗原及HPV检测,对其生物学特性进行初步分析.结果经裸鼠过渡所建立的高分化喉鳞癌细胞系(Lscc-02)目前已传至86代,细胞生长增殖稳定.该细胞系呈单层形式生长,群体倍增时间为39.1h.透射电镜下见胞质内典型的张力原纤维,细胞间以桥粒方式连接.染色体为人类核型,呈亚三倍体,众数分布在63～72.该细胞系具有恶性肿瘤细胞生长特征:软琼脂中形成克隆,裸鼠接种成瘤且形态结构、分化程度与原发瘤相似.免疫组织化学显示高分子量细胞角蛋白及癌胚抗原阳性,PCR显示HPV阴性.结论建立Lscc-02细胞系为研究无HPV感染喉癌的发生、发展规律及HPV与喉癌演进的关系提供了有价值的体外模型.
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