换一批实时聚合酶链反应熔解曲线分析检测APC基因突变
Detection of APC mutation by real-time polymerase chain reaction and melting curve analysis
摘要目的建立一种准确、方便、价廉、适合临床的APC基因突变检测方法.方法采用SYBR GreenⅠ为实时聚合酶链反应(PCR)指示剂,首先从基因组DNA中扩增包含突变位点的靶基因(270 bp),并通过熔解曲线分析确定产物;再以上述片段为模板扩增特定长度的小片段(40/35 bp),以0.5℃/step的速率,获得从65℃到99℃的熔解曲线以检测APC_1309位5 bp缺失突变.结果临床标本检测结果表明:18例结直肠肿瘤患者石蜡组织标本中检出APC_1309位5 bp缺失突变7例,20例正常人外周血标本检测结果均为阴性.结论实时PCR熔解曲线法设计简单,操作简便,结果可靠,可望应用于临床APC基因突变检测,并可推荐用于其他基因突变的检测.
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医学主题词
基因(Genes)突变(Mutation)实时聚合酶链反应(Real-Time Polymerase Chain Reaction)聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction)结肠(Colon)
分类号
R3（基础医学）
栏目名称
DOI
10.3760/j.issn:0529-5807.2005.10.017
发布时间
2005-11-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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