换一批RNA干扰沉默缺氧诱导因子-1α逆转乳腺癌的耐药性
Reversion the multidrug resistance of human breast carcinoma cells by RNA interference targeting HIF-1 alpha gene
摘要目的观察RNA干扰缺氧诱导因子(HIF)-1α逆转乳腺癌耐药性的作用.方法构建靶向缺氧诱导因子-1α的短发夹状小干扰RNA基因并转染到人乳腺癌耐阿霉素细胞株MCF-7/ADR中.常规MTY法检测细胞存活率,外排实验检测细胞的P-糖蛋白转运功能,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞的HIF-1α、多药耐药基因1(mdr-1)mRNA变化,Western印迹法观察干扰前后HIF-1α、P-糖蛋白的变化.结果测序证实成功构建HIF-1α的短发夹状siRNA真核表达载体pSilencer-HIF,转染空质粒ADR/neo不影响肿瘤细胞的耐药性.MTT法检测ADR/shRNA组细胞存活率由76%下降到43%,Rh123荧光强度由22.0%升为86.6%,ADR/shRNA组中HIF-1α、mdr-1mRNA、蛋白水平显著降低(P＜0.05),且Spearman相关分析HIF-1α和mdr-1指数在三组中显示呈正相关(r=0.816,P＜0.01).结论成功构建了HIF-1α的短发夹状siRNA真核表达载体pSilencer-HIF,可显著降低乳腺癌MCF-7/ADR细胞中HIF-1α表达从而起到逆转肿瘤耐药的作用.
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分类号
R73（肿瘤学）
栏目名称
DOI
10.3760/j.issn:0529-5807.2006.06.009
发布时间
2006-06-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家高技术研究发展计划（863计划）（30300124）
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