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人发角蛋白人工腱诱导兔自体腱修复时转化生长因子-β1,2,3 mRNA 及其泛素的表达和分布

Expression and distribution of TGF-β 1,2,3 mRNA and ubiquitin during rabbit tendon repair induced by artificial tendon HHK-Ⅱ

摘要:

目的 研究第2代人发角蛋白(human hair keratin Ⅱ, HHK-Ⅱ)人工腱植入后不同时期转化生长因子-β1,2,3(TGF-β1,2,3) mRNA 的表达及泛素(ubiquitin)的分布。 方法 选用4只新西兰兔制作动物模型,用原位杂交 (in situ hybridization, ISH) 的方法研究HHK-Ⅱ人工腱植入后不同时期TGF-β1,2,3 mRNA 的表达;用免疫组化法研究泛素的分布。 结果 TGF-β1,2,3 mRNA用原位杂交方法均能检测到,但它们分布的位置不同。TGF-β1 mRNA仅存在于人工腱周围新生的腱成纤维细胞质中。TGF-β2 mRNA在新生腱组织中广泛存在,在半成熟的腱组织中也有一定程度的表达;而TGF-β3 mRNA在新生腱组织和较成熟腱组织中表达量很低。在正常自体腱组织中,泛素呈低表达,且均匀分布;HHK-Ⅱ人工腱植入后3周,人工腱之间及其周围的新生腱组织中泛素表现为强阳性;植入后6周和9周的泛素为弱阳性,其中9周的泛素接近正常腱组织。即在人工腱降解期泛素表现为强阳性,自体腱形成期及之后的时期泛素的表达明显下调。 结论 在肌腱修复时,TGF-β1,2可能起主要作用,TGF-β3在肌腱修复过程中起协同作用。人工腱角蛋白的降解可能主要由泛素承担;人工腱周围新生组织中不正常蛋白的清除除有溶酶体参与外,泛素也起主要作用。

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abstracts:

Objective To study the expression of TGF-β1,2,3 mRNA and distribution of ubiquitin after artificial tendon HHK-Ⅱ implantation.  Methods Four New Zealand rabbits were used as animal models to study the mRNA expression of TGF-β1,2,3 by in situ hybridization and to detect the distribution of ubiquitin by immunohistochemistry.  Results TGF-β1, 2, 3 mRNA could be detected, but their distribution was different. Of TGF-β1 mRNA only was located in newly generated fibroblasts around HHK-Ⅱ, of TGF-β2 mRNA displayed in large area of tendon tissues and TGF-β3 mRNA expressed lowly. Ubiquitin was lowly expressed in normal tendon tissues and dispersed evenly. Ubiquitin had high positiveness in the newly generated tissues between HHK-Ⅱ and around it 3 weeks after operation. Ubiquitin was decreased distinctly 6 and 9 weeks after operation. Ubiquitin, 9 weeks after implantation of HHK-Ⅱ, was decreased nearly to the same as that in normal tendon tissues.  Conclusions TGF-β1,2 may play a critical role in tendon healing, TGF-β3 cooperates with them. Degeneration of HHK-Ⅱ keratin may mainly be undertaken by ubiquitin. Lysosome can clear the abnormal protein in newly generated tissues near HHK-Ⅱ, ubuquitin also takes part in this process.

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作者: 胡庆柳 [1] 彭心昭 [1] 傅文玉 [1] 朴英杰 [1]
作者单位: 第一军医大学中心实验室 [1]
期刊: 《中华创伤杂志》2001年17卷2期 102-104页 ISTICPKUCSCD
分类号: R68
栏目名称: 论著
DOI: 10.3760/j:issn:1001-8050.2001.02.012
发布时间: 2004-01-08
基金项目:
国家自然科学基金
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