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卵巢上皮性癌相关抗原的筛选和血清学检测

Screening and sero-immunoscreening of ovarian epithelial cancer associative antigens

摘要:

目的 构建卵巢上皮性癌(卵巢癌)腹水肿瘤细胞的cDNA文库,从中筛选能用于卵巢癌早期诊断和免疫治疗靶点的卵巢癌相关抗原.方法用3例卵巢浆液性囊腺癌、1例卵巢黏液性囊腺癌、1例卵巢子宫内膜样癌患者的腹水肿瘤细胞构建cDNA文库,采用改良的重组克隆表达抗原的血清学鉴定(SEREX)技术与抑制性消减杂交(SSH)方法相结合的策略从文库中筛选卵巢癌相关抗原基因,并对其进行酶切鉴定、核苷酸测序分析.采用重组肿瘤抗原的微型血清学检测(SMARTA)法检测筛选出的卵巢癌相关抗原与96例卵巢癌患者和96例正常妇女的血清中相应自身抗体的阳性反应情况.结果 经两轮血清学筛选和核苷酸测序分析,最终得到55个候选的卵巢癌相关抗原基因片段,代表45个基因,分为6类:(1)与已知的卵巢癌相关基因同源的基因,如BARD1基因等;(2)与其他肿瘤相关基因同源的基因,如TM4SF1基因等;(3)在一些特殊组织中表达的基因,如ILF3、FXR1基因等;(4)与一些特殊功能蛋白基因同源的基因,如TIZ、C1D基因等;(5)与胚胎来源的基因同源的基因,如PKHD1基因等;(6)其余为在基因库GenBank中无同源序列可比对的未知基因,如OV-189基因等.TM4SF1、C1D、BARD1、FXR1、OV-189基因的噬菌体重组融合抗原与卵巢癌患者血清中相应IgG型自身抗体反应的阳性率分别为28%、21%、23%、23%、31%,与正常妇女血清反应的阳性率分别为9%、6%、5%、8%、13%,分别比较,差异均有统计学意义(P<0.01);TIZ、FXR1、OV-189基因的重组抗原与卵巢癌患者血清中相应IgM型自身抗体反应的阳性率分别为26%、28%、18%,与正常妇女血清反应的阳性率分别为8%、11%、7%,分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05).FXR1、OV-189基因的重组抗原与Ⅰ~Ⅱ期卵巢癌患者血清中相应IgG型自身抗体反应的阳性率(分别为34%、46%)高于Ⅲ~Ⅳ期者(分别为16%、23%),两者分别比较,差异均有统计学意义(P值分别为0.045、0.021);OV-189基因的重组抗原与高分化卵巢癌患者血清中相应IgG型自身抗体反应的阳性率(为67%)高于中~低分化者(为26%),两者比较,差异均有统计学意义(P=0.001).TIZ、FXR1基因的重组抗原与Ⅰ~Ⅱ期卵巢癌患者血清中相应IgM型自身抗体反应的阳性率(分别为40%、46%)高于Ⅲ~Ⅳ期者(分别为18%、18%),两者分别比较,差异均有统计学意义(P值分别为0.018、0.004).当联合分析TM4SF1、C1D、TIZ、FXR1基因的重组抗原的相应IgG型自身抗体及TIZ、FXR1基因的重组抗原的相应IgM型自身抗体(即自身抗体谱)时,诊断卵巢癌的敏感度为66%,准确度为73%;将该自身抗体谱与CA125联合时,敏感度、准确度均有明显提高,分别为83%、80%.结论 SEREX技术与SSH方法相结合筛选肿瘤抗原基因是一种行之有效的、能筛选出具有较高特异性肿瘤抗原基因的研究策略;TM4SF1、C1D、TIZ、BARD1、FXR1、OV-189基因的重组抗原在血清中的相应自身抗体可作为卵巢癌诊断的标志物,多个抗原的联合检测可提高诊断效率.

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作者: 阳志军 [1] 杨光 [2] 蒋燕明 [1] 冉宇靓 [2] 杨治华 [2] 张玮 [1] 张洁清 [1] 潘忠勉 [1] 李力 [1]
期刊: 《中华妇产科杂志》2007年42卷12期 834-839页 MEDLINEISTICPKUCSCD
分类号: R73
栏目名称: 临床研究
DOI: 10.3760/j.issn:0529-567x.2007.12.013
发布时间: 2008-03-03
基金项目:
广西科学研究与技术开发计划项目
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