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白细胞介素22对乙醛诱导下肝星状细胞增殖活化的影响及其机制

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目的 研究白细胞介素22 (IL-22)对乙醛诱导的肝星状细胞(HSC)活化增殖的影响,并探讨抗氧化轴Nrf2-keap1-ARE在该作用中的地位.方法 体外培养HSC-T6,采用不同浓度(25、50、100、200、400μmol/L)的乙醛刺激24、48 h后,四甲基偶氮唑盐法测定细胞增殖率以筛选出最佳造模条件.用最适浓度的乙醛(200μmol/L)处理HSC-T6 24 h后,再分别用不同浓度的IL-22(10、20、50ng/ml)干预24 h,四甲基偶氮唑盐法测定细胞增殖情况,同时采用Western blot和免疫细胞化学检测Nrf2、α-平滑肌肌动蛋白的表达情况,分光光度法检测培养上清液中丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)含量的变化.采用SPSS17.0软件进行统计学分析,结果以均数±标准差((x)±s)表示,P< 0.05为差异有统计学意义.多组样本均数的两两比较采用One-way ANOVA分析. 结果 乙醛刺激后HSC增殖活化明显增强,以200μmol/L作用48 h最为明显.加用梯度浓度的IL-22干预后,表现为剂量依赖性地抑制HSC活化增殖,IL-22 10、20、50 ng/ml组增殖移植率分别为14%、25%、35% (P值均<0.05).Western blot和免疫组织化学检测结果均显示各组HSC内Nrf2总蛋白表达无明显差异,而Nrf2核蛋白在空白对照组表达很少;当乙醛刺激后表达增加(与空白组相比,P<0.05),加用梯度浓度IL-22干预后,Nrf2核蛋白表达进一步增加(P值均<0.05).分光光度法显示,与空白组相比,乙醛刺激后培养上清液中MDA、GSH水平均升高,加用梯度浓度的IL-22干预后,MDA水平显著下降,而GSH水平进一步明显升高(P值均<0.05),二者均存在剂量依赖性. 结论 乙醛诱导HSC活化增殖,成功建立了酒精性肝纤维化的体外模型;IL-22对乙醛诱导的HSC活化增殖有明显的抑制作用,其机制可能与促进HSC内Nrf2核转位及下游靶基因GSH表达、增强机体抗氧化轴Nrf2-keap1-ARE的活性有关.

作 者 倪雅惠 (山西医科大学第一医院,太原,030001); 霍丽娟 (山西医科大学第一医院,太原,030001); 李婷婷 (山西医科大学第一医院,太原,030001);
刊 名 中华肝脏病杂志  2017年25卷01期 9-14页  美国国立医学图书馆Medline数据库收录美国《化学文摘》(Chemical Abstracts)收录中国科技论文统计源期刊(中国科技核心期刊)收录中文核心期刊要目总览(北大核心期刊)收录
英文期刊名 Chinese Journal of Hepatology
关键词 白细胞介素22 肝硬化,酒精性 肝星状细胞 Nrf2 氧化应激 Interleukin-22 Alcoholic liver fibrosis Hepatic stellate cells Nrf2 Oxidative stress
栏目名称 肝纤维化·肝硬化
DOI号 10.3760/cma.j.issn.1007-3418.2017.01.004

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