肝硬化患者Th1/Th22失衡特点及其与病程进展的关系

Clinical features of imbalance between Th1 and Th22 cells and its association with disease progression in patients with liver cirrhosis

摘要:

目的 研究各类肝硬化患者Th1/Th22失衡的特点及其与病程进展的关系,探索靶向治疗肝硬化的免疫治疗策略.方法 体外离心法分离外周血单个核细胞,收集细胞进行CD3-BV500及CD8-PerCP-Cy5.5染色,再加入干扰素γ(IFNv)-PE-Cy7、白细胞介素(IL)-17a-APC和IL-22-PE或者相应的同型对照,破膜洗液洗涤1次后加1%多聚甲醛固定.使用Flowjo分析软件进行T淋巴细胞亚群及细胞因子分析.定义Th1 (CD4+IFNγ+),Th 17(C D4+IL-17a+),Th22(CD4+IL-22+)以及Tc1 (CD8+IFNγ+),Tc17(CD8+IL-17a+),Tc22 (CD8+IL-22+),调查上述6个亚群分泌IFN γ、IL-17a、IL-22的情况.LX-2细胞无血清培养,添加不同浓度(25、50、100 ng/ml)的重组人IL-22重组蛋白;24h后用活化指标α-平滑肌肌动蛋白检测LX-2活化情况,体积分数10%胎牛血清作为阳性对照.用酶联免疫吸附试验(化学发光法)检测上清液中透明质酸、Ⅲ型胶原前体、Ⅳ型胶原浓度.据资料不同分别采用one-way ANOVA、Mann-Whitney非参数U检验或Kruskalwallis H非参数检验进行统计学分析.结果 各类病因引起的肝硬化患者外周血Tc1、Th17和Th22细胞均较健康对照组显著增加.所有肝硬化患者Th17细胞频率(4.25%±2.45%)较对照组(2.59%±1.36%)增加了0.64倍,而肝硬化患者Th22细胞平均频率(4.17%±2.55%)较对照组(1.31%±0.64%)增加了2.18倍;尤其是酒精性肝硬化患者,其外周Th17(5.89%±3.44%)和Th22亚群(5.32%±3.67%)较对照组分别增加了1.27倍和3.06倍,P<0.05.特别是酒精性肝硬化患者,其Th22细胞显著增加.抗纤维化和促纤维化因子(Th1/Th22)比值在各类肝硬化患者均显著降低,并与肝硬化严重程度呈正相关,是各类病因引起的肝硬化共同变化的免疫学特征.进一步证实,IL-22能激活肝星状细胞并促其产生胶原.结论 抗纤维化和促纤维化因子(Th1/Th22)失衡是各种病因相关肝纤维化进展的共同特征,也是调节肝脏纤维化进展的主要原因.

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作者: 吴海沁 [1] 赵娟娟 [1] 李捍卫 [1] 张政 [1]
期刊: 《中华肝脏病杂志》2017年25卷10期 738-743页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
栏目名称: 肝纤维化·肝硬化
DOI: 10.3760/cma.j.issn.1007-3418.2017.10.004
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