TRIM8基因对肝癌细胞增殖、侵袭能力的影响及其机制
Effect of TRIM8 gene on proliferation and invasion of hepatocellular carcinoma cells and its mechanism
目的 探讨三结构域蛋白8(TRIM8)基因对肝癌细胞增殖、侵袭能力的影响及其机制.方法 合成表达TRIM8的慢病毒载体,构建稳定表达TRIM8的肝癌细胞株Hep3B-TRIM8、Huh-7-TRIM8过表达组和对照细胞株Hep3B-Vector、Huh-7-Vector(对照组).RT-PCR检测细胞TRIM8表达水平.采用CCK-8法检测两组肝癌细胞的增殖能力,平板克隆实验观察两组细胞克隆形成能力,Transwell实验观察两组细胞侵袭能力.Western blot和免疫组化检测TRIM8和P53蛋白的表达.实验数据比较采用t检验.结果 Hep3B-TRIM8和Huh-7-TRIM8过表达组TRIM8 mRNA表达量分别为(4.47±0.29)×10-3、(2.43±0.41)×10-3,明显高于对照组的(0.60±0.10)×10-3、(0.19±0.01)×10-3(t=12.570,5.458;P<0.05).细胞生长曲线显示过表达组肝癌细胞的增殖能力明显弱于对照组.Hep3B-TRIM8和Huh-7-TRIM8过表达组细胞克隆数分别为(69±9)、(52±8)个,明显少于对照组的(132±11)、(103±5)个(t=-4.503,-5.643;P<0.05).Hep3B-TRIM8和Huh-7-TRIM8过表达组穿膜细胞数为(15.7±2.9)、(11.3±1.5)个,明显少于对照组的(42.3±3.2)个(t=-6.191,-11.360;P<0.05).与对照组相比,过表达组肝癌细胞的TRIM8和P53蛋白表达明显增强.结论 TRIM8基因可抑制肝癌细胞增殖、侵袭,其机制可能是通过恢复P53抑癌活性,协同发挥抑癌作用.
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