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血管内皮生长因子真核表达载体的构建及其在培养鼠心肌细胞中的表达

Construction of eukaryotic expression vector of VEGF165 gene and its expression in rat cardiomyocytes

摘要:

目的构建血管内皮生长因子(VEGF165)真核表达载体,并检测其在鼠心肌细胞中的表达.方法应用DNA重组方法,将编码hVEGF165全长cDNA克隆于真核表达载体pCR3中,构建pCR3.hVEEGF165真核表达载体,使用脂质体包裹的方法将真核表达载体pCR3.hVEGF165转染至培养鼠心肌细胞中,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)、Southern blot、免疫组织化学染色、酶联免疫吸附测定法检测VEGF165基因在心肌细胞中的表达和分泌.结果将构建好的真核表达载体pCR3.hVEGF165转染心肌细胞后,VEGFmRNA及蛋白水平明显增高.结论成功构建了真核表达载体pCR3.hVEGF165,其转染心肌细胞后能够获得较高水平的VEGF蛋白.

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作者: 郝亚荣 [1] 李建军 [1] 李庚山 [1]
第一作者: 郝亚荣
分类号: Q786
栏目名称: 基础研究
DOI: 10.3969/j.issn.1009-0126.2005.01.015
发布时间: 2006-11-27
基金项目:
湖北省科技攻关项目
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