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分泌人共刺激分子B7-2重组BCG对膀胱癌的体外作用

In vitro effects of recombinant bacille Calmette-Guérin (BCG) expressing human B7-2 on bladder cancer cell line

摘要:

目的构建可分泌表达人共刺激分子B7-2的重组BCG,并观察其对膀胱癌细胞的作用.方法利用电穿孔技术将pYL-hB7-2穿梭质粒转导入野生型BCG中;卡那霉素抗性、PCR及测序筛选重组BCG菌株(rBCG-hB7-2);SDS-PAGE和ELISA检测重组BCG的表达产物B7-2分子,并测定rBCG-hB7-2对淋巴细胞的增殖作用及对膀胱癌细胞的杀伤作用.结果获得的阳性菌株rB-CG-hB7-2具有卡那霉素抗性,其PCR产物测序后与已发表的人B7-2基因cDNA序列一致.通过SDS-PAGE可见29 200的目的蛋白条带含量增加,ELISA法检测出培养上清液及菌体内均有B7-2分子表达,上清液中含量为3.8 U/ml,菌体内为10.5 U/ml.体外实验中,重组BCG较野生型BCG刺激淋巴细胞增殖数量增加34.8%,重组BCG所激活淋巴细胞对膀胱癌细胞的杀伤能力是野生型的2.14倍.结论成功构建了可分泌具有共刺激活性B7-2分子的基因重组BCG菌株,为该菌株进一步临床应用提供了实验依据.

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作者: 王靖宇 [1] 韩瑞发 [2] 马腾骧 [2] 刘春雨 [2] 卢炳新 [2] 范晓东 [2] 王东文 [1]
期刊: 《中华泌尿外科杂志》2006年27卷z1期 15-17页 ISTICPKUCSCDCA
关键词: 膀胱肿瘤基因
分类号: R73R69
栏目名称: 泌尿系肿瘤
DOI: 10.3760/j:issn:1000-6702.2006.z1.004
发布时间: 2006-05-11
  • 浏览:61
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