切应力诱导人内皮细胞白细胞介素-8基因的转录活化
Transcriptional activation of interleukin-8 gene induced by shear stress in human umbilical vein endothelial cells
目的本研究检测层流低切应力诱导人脐静脉血管内皮细胞IL-8基因的转录激活.方法 RT-PCR检测4.2 dyne/cm2切应力处理0.5、1、2 h 人脐静脉血管内皮细胞的IL-8 mRNA表达.构建IL-8报告基因质粒pEGFP1-IL8 USCS,转染脐静脉血管内皮细胞,切应力刺激3 h后,流式细胞仪分析绿色荧光蛋白表达.免疫荧光细胞化学染色观察切应力处理脐静脉血管内皮细胞 0.5、1、1.5、2 h的NF-κB p65核转移.用对照和切应力处理10、20、30、60 min的脐静脉血管内皮细胞胞质蛋白,进行IκB和磷酸化IκB的免疫印迹.结果低切应力刺激可诱导脐静脉血管内皮细胞表达IL-8 mRNA.切应力刺激后,重组质粒转染的血管内皮细胞表达IL-8 绿色荧光蛋白报告基因.切应力诱导NF-κB向胞核内转移,和IκB的磷酸化和降解.结论 NF-κB传导通路可能介导切应力诱导脐静脉血管内皮细胞IL-8 基因的转录活化,参与动脉粥样硬化的形成.
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