换一批
换一批摘要目的利用核酶技术切割肿瘤多药耐药基因(MDR1 ),逆转肿瘤抗药性.方法按照"锤头结构"模型设计、合成了核酶196MDR1 (196 RZ),并定向克隆入包含RNA多聚酶III启动子的逆转录病毒载体中.通过脂质体介导,将抗mdr1核酶表达质粒 (N2A+ tRNAimet -iMDR1-Rz)导入人肝癌耐药细胞株HepG2.分别采用RT-PCR、荧光PCR、蛋白质印迹分析(western blot)、流式细胞仪检测术、罗丹明聚集及MTT方法,观察细胞的RZ、mdr1 mRNA、P糖蛋白(Pgp)表达和对化疗药物敏感性的变化.结果经抗MDR1核酶处理的耐药HepG2细胞,RZ稳定表达,MDR1 mRNA、Pgp明显降低,细胞内罗丹明聚集,对阿霉素的敏感性提高200倍.结论针对多药耐药基因mdr1的核酶可明显降解mdr1 mRNA,抑制Pgp的表达,具有强大的逆转肝癌耐药细胞HepG2多药耐药的作用.
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10.3760/j.issn.0529-5815.2004.07.011
发布时间
2004-09-16
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