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转4-1BBL基因小鼠肝癌细胞瘤苗体外诱导抗肿瘤免疫应答的研究

Antitumor immune responses induced by gene transfer of 4-1BBL into hepatocellular carcinoma Hepa1-6 in vitro

摘要:

目的研究转4-1BBL基因小鼠肝癌细胞疫苗体外诱导淋巴细胞特异性杀伤活性及刺激同系小鼠脾细胞产生细胞因子(IL-2、TNF-α和GM-CSF)的能力.方法采用脂质体介导法将真核表达质粒pCDNA3.1(+)-m4-1BBL导入小鼠肝癌细胞Hepa1-6,经G418筛选后获得稳定高表达克隆,以丝裂霉素C(MMC)处理后,制成肿瘤细胞疫苗(TCV),经体外与同系小鼠脾淋巴细胞共同培养后,测定淋巴细胞特异性杀伤活性及对脾细胞产生细胞因子(IL-2、TNF-α和GM-CSF)的影响.结果转染4-1BBL的Hepa1-6细胞能够高表达4-1BBL蛋白,并且经MMC处理后制成的瘤苗在培养48 h仍能表达m4-1BBL.与野生型的Hepa1-6细胞相比,上述瘤苗能诱导淋巴细胞产生针对亲本的小鼠肝癌细胞Hepa1-6的特异性杀伤作用(P<0.05),但是对于小鼠肝癌细胞H22及成纤维细胞NIH3T3无效;此瘤苗在体外能显著增强脾细胞分泌细胞因子IL-2、TNF-α和GM-CSF的能力.结论转4-1BBL基因小鼠肝癌细胞疫苗能诱导有效的抗肝癌免疫反应.

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