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血管紧张素Ⅱ1型受体的短发夹环RNA抑制大鼠血管平滑肌细胞增殖的研究

Inhibition of hyperplasia of vascular smooth musle cells in rat by the plasmid containing the short hairpin RNA of angiotensin Ⅱ type 1 receptor

摘要:

目的探讨血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)的短发夹环RNA(shRNA)质粒(pAT1R-shRNA)对大鼠血管平滑肌细胞增殖变化的影响并探讨其发生机制.方法构建pAT1R-shRNA质粒转染入鼠血管平滑肌细胞中,应用逆转录聚合酶链反应及Western blot检测血管平滑肌细胞(VSMC)AT1R的mRNA和蛋白表达的变化;倒置相差显微镜观察VSMC形态学的变化;锥虫蓝染色法和MTT法检测VSMC增殖的变化等.结果构建的质粒经测序鉴定验证与预期相符.转染细胞后逆转录聚合酶链反应的吸光度值比值结果pAT1R-shRNA1和pAT1R-shRNA2组分别为1.37±0.15和1.45±0.12,与对照组2.09±0.26相比差异有显著性意义(P<0.01);Western blot吸光度值比值结果两质粒转染组分别为1.12±0.04和1.20±0.07,与对照组3.17±0.21相比差异有显著性意义(P<0.01),提示两质粒均能明显降低AT1R的mRNA和蛋白表达.转染质粒同时加血管紧张素Ⅱ组的细胞计数结果两质粒转染组分别为5.48±0.44和5.55±0.45,与对照组8.13±0.41相比均减少、差异有显著性意义(P<0.01),MTT法结果两质粒转染组吸光度值分别为0.365±0.024和0.307±0.025,与对照组0.485±0.011相比均降低、差异有显著性意义(P<0.01),提示两质粒均能明显抑制VSMC增殖,与VSMC形态学检测结果相符.结论 pAT1R-shRNA能显著抑制VSMC的AT1R的mRNA和蛋白的表达,并对血管紧张素Ⅱ所诱导的VSMC增殖有抑制作用.

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作者: 孙成林 [1] 段志泉 [1] 辛世杰 [1] 冯宗承 [1] 张京红 [1] 古峻 [1] 张强 [1]
第一作者: 孙成林
期刊: 《中华外科杂志》2004年42卷22期 1357-1362页 MEDLINEISTICPKUCSCD
分类号: R6
栏目名称: 普通外科
DOI: 10.3760/j:issn:0529-5815.2004.22.004
发布时间: 2004-12-23
基金项目:
国家自然科学基金
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