转染病毒白细胞介素10基因对同种小鼠心脏移植生存的影响
Transfection with virus interleukin-10 to prolong murine heart allograft
摘要目的了解病毒白细胞介素10(vIL-10)基因对同种小鼠移植心脏的影响.方法用小鼠干细胞病毒(MSCVneo)逆转录病毒表达系统和vIL-10 cDNA构建MSCVneo-vIL-10重组体,在体外转导CBA(H-2K)小鼠的造血干细胞,输入经致死量照射(900 rad)的同基因CBA(H-2K)小鼠体内,8周后以vIL-10表达阳性的CBA(H-2K)小鼠(12只,实验组)作为受体,C57BL/6(H-2b)小鼠为供体,进行同种腹部异位心脏移植,以未处理、移植无病毒转染的造血干细胞(HSCs)、移植空MSCVneo转染的HSCs鼠(均为10只)为对照组.在移植后第8天,每组受体动物各杀死5只,取出移植心脏行组织病理学、CD+4与CD+8 T淋巴细胞浸润(免疫荧光抗体法)检查,IL-2、 IL-4 、IL-6、小鼠IL-10(mIL-10)、γ干扰素(IFN-γ)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、B7-1 、B7-2 mRNA表达的测定[逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法],余下的动物观察移植心脏存活时间.结果 (1)实验组移植心脏存活时间(80.0±33.3)d,其他对照组分别为(10.4±1.0),(11.6±1.1)与(11.2±1.7)d(P<0.01);(2)实验组心肌炎性细胞浸润稀少、心肌结构完整、无明显血管炎,急性排斥反应Ⅰ级,而其他对照组则出现严重的炎性细胞浸润、心肌灶性坏死、心内膜炎、血管炎和心肌出血,急性排斥反应均为Ⅲ级;(3)实验组移植物内 IL-2、IFN-γ、B7-1、和B7-2和iNOS的mRNA表达明显下调,而其他对照组显著上调(P<0.01);(4)实验组移植物内CD+4、CD+8 T淋巴细胞浸润明显减少,与其他对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 vIL-10能保护同种异体移植心脏,推迟和减轻移植心脏急性排斥反应的发生,延长移植心脏动物的生存时间.
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