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丙型肝炎病毒核心蛋白诱导人胆管上皮细胞转化及成瘤实验

Human normal biliary epithelial cells tranformation and tumor development induced by hepatitis C virus core protein

摘要:

目的探讨丙型肝炎病毒核心蛋白(HCV-C)对人胆管上皮细胞(BEC)的转化及致癌作用.方法通过脂质体介导将含有HCV-C基因重组真核表达载体pcDNA HCV-C导入BEC细胞,G418筛选表达目的基因的细胞;聚合酶链反应(PCR)及免疫组织化学SABC法检测细胞中HCV-C 基因及蛋白的表达;细胞计数、锚着非依赖性生长实验、成瘤性检测等鉴定其生物学行为变化,免疫组织化学SABC法检测所致肿瘤组织中HCV-C蛋白表达.结果 HCV-C转染的BEC 细胞中HCV-C蛋白表达于胞质,质粒pcDNA HCV-C转染细胞的倍增时间较pcDNA3转染细胞和未转染BEC细胞明显缩短(分别为14 h,28 h,30 h).pcDNA HCV-C和pcDNA3转染细胞及未转染BEC在软琼脂中的克隆形成率分别为36.0%、2.5%和1.5% (P<0.01).3种细胞接种裸鼠后,pcDNA HCV-C转染细胞注射组出现肿瘤,病理学检查证实为胆管细胞癌,肿瘤组织有HCV-C蛋白的表达.而pcDNA3转染细胞及未转染BEC细胞注射组在注射36 d后仍未见肿瘤发生.结论 HCV-C 蛋白具有促胆管细胞转化和促进肿瘤发生的作用.

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