换一批
换一批转染核结合因子a1/成骨细胞特异性转录因子2基因在兔皮肤成纤维细胞成骨表达中的作用
Osteogenesis of rabbit skin fibroblast transfected with core binding factor a1/osteoblast specific transplanting factor-2 gene
摘要目的探讨外源性小鼠核结合因子a1(Cbfa1)/成骨细胞特异性转录因子2(Osf2)基因在兔皮肤成纤维细胞中的瞬时表达对该细胞成骨表型表达的作用.方法在阳离子脂质体介导下,将含外源性小鼠Cbfa1/Osf2基因的真核表达载体pSG5-Cbfa1/Osf2导入新西兰兔皮肤成纤维细胞.用RT-PCR方法检测Cbfa1、骨钙素、碱性磷酸酶及Ⅰ型胶原前肽基因表达,以Western-Blot方法检测Cbfa1蛋白表达,以对硝基苯二磷酸底物法及放射免疫方法分别检测碱性磷酸酶活性及骨钙素分泌情况,并通过茜素红染色及扫描电子显微镜检测转染细胞形成骨性结节的能力.结果转染pSG5-Cbfa1/Osf2真核表达质粒的兔皮肤成纤维细胞内可见Cbfa1mRNA及Cbfa1蛋白瞬时表达,骨钙素mRNA、碱性磷酸酶mRNA及Ⅰ型胶原前肽mRNA大量表达,碱性磷酸酶活性增强,骨钙素大量分泌,细胞表面形成骨性结节.结论转染pSG5-Cbfa1/Osf2真核表达质粒的兔皮肤成纤维细胞能表达成骨相关基因及蛋白质,并在其表面形成骨性结节.
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主题词
成纤维细胞(Fibroblasts)转染(Transfection)成骨细胞(Osteoblasts)基因(Genes)敏感性与特异性(Sensitivity and Specificity)
分类号
R6
栏目名称
DOI
10.3760/j.issn.0529-5815.2005.04.013
发布时间
2005-03-31
基金项目
国家自然科学基金（30070759）；
上海市青年科技启明星计划（01QM1-11409）
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