溴隐亭联合肿瘤坏死因子-α对人肝癌耐药细胞株化疗敏感性的影响

Study on sensitivity to chemotherapy by combination therapy with tumor necrosis factor-α and bromocriptine in the multidrug resistant subcell line of HepG2

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摘要目的研究溴隐亭联合肿瘤坏死因子-α(TNF-α)基因处理人肝癌耐药细胞株HepG2/ADM后对其化疗敏感性的影响.方法脂质体转染TNF-α基因至肝癌耐药细胞HepG2/ADM;实验分4组:空白对照组HepG2(A组)、耐药组HepG2/ADM(B组)、转染TNF-α基因组(C组)及联合溴隐亭和TNF-α组(D组);流式细胞仪检测各组罗丹明123细胞内潴留率变化、四唑盐比色法(MTT)检测C、D两组细胞耐药指数及用免疫组织化学染色、Western blot和RT-PCR方法测定各组PKC-α、P-gp蛋白、MDR1 mRNA表达的变化,流式细胞仪检测Bcl-2蛋白的表达,AnnexinV-FITC,PI双标检测各组肿瘤细胞化疗后凋亡的变化.结果 MTT测定C、D两组之间耐药逆转率有显著差异(P＜0.01),罗丹明123潴留率实验发现C、D两组均能明显增强其潴留作用且两组差异有统计学意义(P＜0.01);P-gp蛋白和MDR1基因表达显示C、D两组之间MDR1基因和P-gp蛋白的表达无统计学意义(P＞0.05),但C、B两组之间比较差异有统计学意义(P＜0.01);PKC-α蛋白表达在D组明显下调(P＜0.01);B组细胞Bcl-2蛋白表达明显增强,C、D两组细胞Bcl-2蛋白表达明显下调,与A组比较均有统计学意义(P＜0.01),但C、D两组细胞Bcl-2蛋白表达无统计学意义(P＞0.05).细胞凋亡率C、D两组比较有统计学意义(P＜0.01),D、A两组比较无统计学意义(P＞0.05).结论溴隐亭和TNF-α通过不同的机制逆转肿瘤的多药耐药性,两者联合明显加强抗肿瘤药物对细胞的毒力.