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Kindlin-2诱导胆囊癌细胞上皮间质转化促进其侵袭转移的实验研究

Kindlin-2 promotes gallbladder cancer metastasis and invasion by inducing epithelial-mesenchymal transition

摘要:

目的 探讨黏着斑蛋白Kindlin-2对胆囊癌细胞生物学行为的影响及相关分子机制.方法 收集2012年9月至2013年5月在郑州大学第一附属医院肝胆胰外科接受手术切除的30例胆囊癌组织和癌旁组织标本.使用real-time PCR和免疫组化方法检测胆囊癌组织和癌旁组织标本中Kindlin-2表达水平;通过构建质粒和转染使胆囊癌细胞株GBC-SD、SGC-996过表达Kindlin-2,应用细胞黏附实验观察胆囊癌细胞与胞外基质的黏附能力,通过Transwell侵袭实验及细胞划痕实验观察胆囊癌细胞的侵袭迁移能力改变;采用免疫印迹法检测过表达Kindlin-2后胆囊癌细胞上皮间质转化相关标记蛋白的变化.分别使用t检验和 χ2检验对计量资料和计数资料进行统计学分析.结果real-time PCR和免疫组化检测结果显示,Kindlin-2在人胆囊癌组织中表达水平高于癌旁组织(t=4.372,P=0.001;t=7.477,P=0.000),肿瘤组织Kindlin-2表达水平与Nevin分期密切相关(χ2=5.932,P=0.035);细胞黏附实验结果显示,过表达Kindlin-2后胆囊癌细胞株GBC-SD、SGC-996与细胞外基质分子纤连蛋白Fibronectin的黏附能力较对照组增强(1.66±0.03比1.07±0.22,t=2.710,P=0.041;2.66±0.24比1.03±0.02,t=6.610,P=0.020);Transwell侵袭实验结果显示,过表达Kindlin-2后胆囊癌细胞株GBC-SD、SGC-996穿过Transwell小室基质的细胞数较对照组明显增多(116.1±13.9比54.7±8.4,t=3.781,P=0.0194;136.3±7.5比64.3±6.4,t=7.302,P=0.002);细胞划痕实验结果显示,过表达Kindlin-2后胆囊癌细胞株GBC-SD 12 h和24 h划痕修复率高于对照组[(42.9±2.2)%比(29.7±1.7)%,t=4.690,P=0.009;(65.0±2.4)%比(40.4±2.0)%,t=7.945,P=0.001],过表达Kindlin-2后胆囊癌细胞株SGC-99612 h和24 h划痕修复率高于对照组[(32.9±1.3)% 比(24.1±1.5)%,t=4.518,P=0.011;(51.3±1.1)% 比(39.2±1.1)%,t=8.001,P=0.001];免疫印迹法检测结果显示,过表达Kindlin-2后胆囊癌细胞间质化表型神经钙黏素、波形蛋白表达上调而上皮化表型上皮钙黏素表达降低.结论 Kindlin-2在胆囊癌组织中表达水平升高,且可通过诱导上皮细胞间质转化促进胆囊癌细胞与胞外基质黏附、侵袭迁移等恶性行为.

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作者: 陆旭 [1] 周闯 [1] 李仁锋 [1] 叶健文 [1] 翟文龙 [1]
第一作者: 陆旭
期刊: 《中华外科杂志》2018年56卷8期 617-622页 MEDLINEISTICPKUCSCD
栏目名称: 论著
DOI: 10.3760/cma.j.issn.0529-5815.2018.08.013
发布时间: 2018-08-27
基金项目:
河南省高校科技创新人才支持项目
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