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氧化低密度脂蛋白对大鼠主动脉平滑肌细胞尾加压素Ⅱ受体表达的影响

Effects of oxidized-low density lipoprotein on expression of urotensin Ⅱ receptor GPR14 in rat aortic smooth muscle cells

摘要:

目的探讨氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)和尾加压素Ⅱ(UⅡ)对大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的相互作用及ox-LDL对UⅡ受体表达的影响.方法应用MTT法测定不同浓度的ox-LDL(0.01、0.1、1、10、50 μg/ml)和UⅡ(10、50 nmol/L)对大鼠VSMC增殖的作用;应用竞争RT-PCR和放射性配体受体结合试验分别从mRNA和受体功能水平分析不同浓度ox-LDL孵育下VSMC表达GPR14的变化.并设生理盐水对照组.结果 ox-LDL 0.01 μg/ml与UⅡ 10 nmol/L可协同促进VSMC增殖,使MTT值增至对照的162%±29%(0.528±0.036 vs 0.308±0.026,P<0.01);而在0.1 μg/ml时MTT值减弱为对照的153%±22%(0.461±0.017 vs 0.308±0.026,P<0.05);至1 μg/ml时二者协同作用消失,MTT值降为对照的123%±13%(0.400±0.015 vs 0.308±0.026,P>0.05).在浓度为50 μg/ml时ox-LDL则表现为细胞毒性,抑制细胞增殖,MTT值下降至对照的59%(0.195±0.017 vs 0.308±0.026,P<0.01),而UⅡ则可部分拮抗其细胞毒性,使MTT值增至对照的68%.竞争PCR显示ox-LDL 0.1 μg/ml可使VSMC GPR14 mRNA表达上调25%(P<0.01).而1~50 μg/ml可浓度依赖性下调GPR14 mRNA表达,最大效应于50 μg/ml时可使GPR14 mRNA下调73%(P<0.01),此效应具有时间依赖性,于12 h达最大效应,并持续至24 h.ox-LDL 0.1 μg/ml孵育12 h可使大鼠125I-UⅡ与VSMC最大结合力(Bmax)升高18%(P<0.01),而ox-LDL 50 μg/ml可使Bmax下降低69% (P<0.01).结论 UⅡ和ox-LDL可在一定浓度范围内协同促进VSMC增殖;低浓度ox-LDL可使VSMC表达GPR14水平上调,而高浓度则可使该受体下调.

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作者: 王志坚 [1] 丁文惠 [1] 史力斌 [1] 卜定方 [2] 任自文 [1] 唐朝枢 [3]
期刊: 《中华医学杂志》2006年86卷4期 242-246页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
分类号: R5
栏目名称: 论著
DOI: 10.3760/j:issn:0376-2491.2006.04.007
发布时间: 2006-04-06
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