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利用灌注型生物反应器促进干细胞在大段磷酸三钙载体内扩增

Using perfusion bioreactor for mesenchymal stem cell proliferation in large tricalcium phosphate scaffold

摘要:

目的探讨灌注培养法体外构建大段细胞-载体复合物的可行性.方法利用灌注型生物反应器对复合骨髓基质干细胞的大段磷酸三钙柱状载体进行动态灌注培养(动态培养组)1、2、4周或传统静态培养(静态培养组)2、4周,通过葡萄糖日耗量、细胞活力(MTT比色法)检测以及硬组织切片观察、检测干细胞在载体内的扩增情况.结果葡萄糖的日消耗量随培养时间的延长而增加,培养前2周较后2周增加更迅速,动态培养组的葡萄糖日耗量明显大于静态培养组.细胞活力随培养时间的延长而增大,动态培养组的细胞活力明显高于静态培养组.动态培养4周时细胞活力高于2周(9.04±0.79 vs 7.98±0.67,P<0.05),而静态培养2周和4周时细胞活力未发生显著变化(2.55±0.23 vs 2.65±0.31,P>0.05).在动态灌注培养下,骨髓基质干细胞能够在大段载体中心及周缘存活并增殖,而在静态培养下,骨髓基质干细胞仅能在载体周缘存活增殖,细胞数量明显少于动态培养组.动态培养4周组织占孔率明显大于2周(67.92%±12.28%vs 50.04%±8.44%,P<0.05).静态培养4周和2周时的组织占孔率无显著性变化(6.78%±1.85%vs 6.63%±2.73%,P>0.05).结论灌注型生物反应器使骨髓基质干细胞在大段三维载体内存活并增殖,提高细胞在载体内的复合效率.

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