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Smad7对转化生长因子β1诱导的肺泡上皮细胞向间质细胞转变的影响

Effect of Smad7 on transforming growth factorβ1-induced alveolar epithelial to mesenchymal transition

摘要:

目的 检测转化生长因子(TGF)β1能否在体外诱导肺泡Ⅱ型上皮细胞向间质细胞转变(EMT),以及Smad7基因转染能否阻止此种转变及相关信号转导机制.方法 采用脂质体法转染Smad7基因到大鼠肺泡Ⅱ型上皮(RLE-6TN);实时荧光PCR及免疫印迹法检测转染前后上皮细胞标志物(E-cadherin,CK19)、间质细胞标志物(FN、Vimentin及α-SMA)及Smad信号通路相关蛋白表达变化;相差显微镜观察TGFβ1诱导的肺泡上皮细胞形态改变,其超微结构改变采用透射电镜观察.结果 成功转染Smad7到RLE-6TN;转染前,在TGFβ1作用下,RLE-6TN间质标志物的表达在mRNA和蛋白水平上调,而上皮标志物表达下调;转染后,其间质标志物下调的同时上皮标志物上调;转染前RLE-6TN在TGFβ1作用下p-Smad2/3表达上调,转染后其表达无明显改变;形态学上,TGFβ1能诱导肺泡上皮发生EMT,Smad7转染则能阻止EMT;超微结构上,TGFβ1能诱导肺泡上皮特有板层小体变性、肿胀并随其时间延长最终完全消失.结论 TGFβ1能在体外诱导肺泡Ⅱ型上皮向间质细胞转变,其机制部分与Smad信号转导途径相关,Smad7转染能在一定程度上阻止该转变.

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