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脊髓内注射不同量液体及不同药物对正常大鼠神经功能的影响

Impact of different drugs and different volumes injected intraspinally on the nerve function: experiment with rats

摘要:

目的 探寻正常大鼠脊髓实质内注射,液体量大小及药物对脊髓神经功能的影响及适用于脊髓损伤基因治疗的安全注射量.方法 采用(4×3)析因实验设计将96只成年健康SD大鼠随机分为12组,每组大鼠依分组情况分别于T13椎体水平注射NS或病毒缓冲液或Ad-LacZ(1×109 pfu/ml)2、4、6、10 μl.另取6只成年健康SD大鼠作为手术对照组,只行椎板减压术,不进行微注射.术后不同时间采用BBB评分标准对每组大鼠进行后肢运动功能检查.术后1、2、4周处死大鼠,病理学分析确定有效组织保留率.Ad-LacZ各组切片行X-gal染色,观察重组腺病毒在脊髓中的表达.结果 神经功能损伤及组织损伤程度随注射量增大而加重,不同注射液体量间比较差异有统计学意义(P=0.000).不同注射药物间进行比较,Ad-LacZ组损伤程度重于NS组及病毒缓冲液组,差异有统计学意义(P=0.044).NS组与病毒缓冲液组比较,差异无统计学意义(P=1.000).Ad-LacZ不同液体量各组均可完成对脊髓灰质神经细胞和胶质细胞的转染,术后4周阳性细胞数减少.结论 脊髓实质内微注射本身就可引起组织损伤及神经功能障碍.重组腺病毒可引起组织的免疫反应,加重脊髓损伤.对于正常大鼠脊髓,4 μl的重组腺病毒为相对安全注射量;6 μl为临界注射量,应谨慎把握.

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