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siRNA抑制乙型肝炎病毒在HepG2.2.15细胞中的复制与表达

Transfection of siRNA expressing plasmids targeting S gene inhibits replication and expression of hepatitis B virus in hepatic cancer cells

摘要:

目的 探讨靶向HBV S基因的siRNA表达质粒在HepG2.2.15细胞中对HBV病毒的复制与表达的抑制效应及其抗病毒活性.方法 设计并构建了两个靶向HBV S基因的siRNA表达质粒S1和S2,随机设计的用于对照的非同源siRNA表达质粒S3.首先在HepG2.2.15细胞中通过实时荧光定量PCR评估该siRNA表达质粒对HBV mRNA表达的抑制效应,接着在HepG2.2.15细胞中通过ELISA方法进一步枪测它们的抗病毒活性细胞上清液中HBV标志性蛋白HBsAg、HBeAg的表达水平.结果 在siRNA表达质粒转染HepG2.2.15细胞后48 h,HBV S基因mRNA表达量下降64%~88%,HBsAg和HBeAg的表达水平分别降低了60%~82%和56%~78%.S1+S2联合使用转染细胞中显著抑制HBV病毒的复制与表达的效率,而对照组S3无抑制效果.结论 发现靶向HBV S基因的siRNA表达质粒能够在HepG2.2.15细胞中有效的抑制HBV病毒的复制与表达,并能够降低细胞上清液中HBsAg和HBeAg的表达水平.S1+S2联合使用转染细胞中可以显著抑制HBV的复制与表达的效率.RNAi可能成为防治HBV感染有效的全新的抗病毒防御策略.

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作者: 边中启 [1] 崔志磊 [1] 陈维灶 [2] 刘明秋 [2] 严维耀 [2] 郑兆鑫 [2]
作者单位: 成都军区昆明总医院传染病中心,昆明,650032 [1] 上海复旦大学遗传工程国家重点实验室 [2]
期刊: 《中华医学杂志》2009年89卷5期 347-351页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
分类号: R5
栏目名称: 基础研究
DOI: 10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2009.05.016
发布时间: 2009-04-08
  • 浏览:70
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