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张力敏感性阳离子通道在机械牵张引起气道黏液高分泌中的作用

The effects of stretch sensitive positive ion channel on the high externalization of MUC5AC in airway epithelial cells by mechanical stretching

摘要:

目的 观察张力敏感性阳离子通道、Ca2+内流和豆蔻酰化富丙氨酸C激酶底物(MARCKS)在机械牵张引起气道黏液高分泌中的作用.方法 人气道黏膜上皮细胞(HBE16)体外培养,采用小型生物撞击机给予机械牵张刺激,各组培养细胞依施加条件不同而分为对照、牵张、牵张+钆、牵张+硝苯吡啶、牵张+低分子量肝素、牵张+MARCKS效应结构域(ED)锁核酸(LNA)以及牵张+MARCKS的ED无关对照LNA序列共7组,分别采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫荧光法观察与胞吐相关的突触相关膜蛋白SNAP23以及黏蛋白(MUC)5AC mRNA和蛋白表达,酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测细胞培养上清中MUC5AC分泌.结果 机械牵张能显著升高人气道黏膜上皮细胞中SNAP23和MUC5AC表达,显著提升细胞培养上清中MUC5AC分泌(P<0.05);钆、硝苯吡啶、MARCKS的ED-LNA均能抑制机械牵张对SNAP23表达和MUC5AC表达、分泌的提升作用(均P<0.05);而低分子量肝素未能显著降低SNAP23表达和MUC5AC表达、分泌(P>0.05).结论 机械牵张能升高人气道黏膜上皮细胞MUC5AC的表达,其机制可能与张力敏感性阳离子通道、Ca2+内流和MARCKS途径有关.

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