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周期性张应变对颈椎后纵韧带细胞形态及凋亡影响的体外观察

Morphologic and apoptotic changes of cervical posterior longitudinal ligament fibroblasts in response to in vitro mechanical stretch

摘要:

目的 研究周期性张应变对体外培养的后纵韧带骨化(OPLL)患者的后纵韧带细胞形态及凋亡的作用.方法 组织块贴壁法培养后纵韧带细胞,选用第3代细胞,长至80%融合时,用含1%血清的培养基同步化24 h后,使用Flexerce114000TM细胞应变加载系统对细胞施加周期性张应变,作用6及24 h,牵拉幅度为10%.运用流式细胞仪对细胞凋亡水平进行检测,β-gal染色评价细胞衰老率.同时,检测细胞碱性磷酸酸(ALP)、Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)和骨钙素(OC)mRNA的变化.结果 与不加力的对照组相比,受力组细胞被拉长,并呈垂直作用力的方向取向排列;6 h组较对照组凋亡率略有升高,但差异无统计学意义;24 h组则明显升高(P<0.05);6 h组与24 h组较对照组细胞衰老率无明显变化.ALP、Col Ⅰ和OC mRNA表达水平均升高,24 h组升高更明显(P<0.05).结论 周期性张应变对后纵韧带细胞的形态具有影响,应变刺激在促进OPLL细胞成骨分化的过程中,同时促进了细胞凋亡和功能的改变.

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