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人参皂苷Rg1调节N2a/APP695细胞β分泌酶活性的可能机制

Mechanism of ginsenoside Rg1 regulating the activity of β secretase in N2a/APP695 cells

摘要:

目的 观察人参皂苷Rg1能否通过核蛋白因子κB(NF-κB)影响N2a/APP695细胞β淀粉样肽(Aβ)的生成和代谢,从源头上缓解和(或)减轻阿尔茨海默病(AD)病人的神经病理改变.方法 利用稳定表达突变型APP695的N2a细胞(N2a/APP695),通过RT-PCR、蛋白免疫印迹、激光共聚焦显微镜等方法检测人参皂苷Rg1对β分泌酶活性及上游转录因子NF-κB活性的影响.结果 2.5 mol/L人参皂苷Rg1作用6~12 h后,N2a/APP695细胞外液Aβ1-40和Aβ1-42水平较Rg1作用前均有不同程度的下降[最低值分别为(13.3±4.3 )ng/ml及(12.0±5.4) ng/ml];BACE1的蛋白表达水平下降(BACE1/β-肌动蛋白比值为0.26±0.05);NF-κB p65蛋白表达水平明显增加(磷酸化p65/总p65比值为0.93±0.02)并诱导促进NF-κB的核转位;NFκB的抑制剂quinazoline预处理后可见人参皂苷Rg1对BACE1 mRNA和蛋白表达的抑制作用明显减弱.结论 人参皂苷Rg1能激活NF-κB,促进NF-κB的核转位,增加与BACE1启动子相应位点的结合,导致β分泌酶的活性减少.

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