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C反应蛋白诱导肾小管上皮细胞TGFβ1表达的受体途径

Effects of C-reactive protein on the expression of transforming growth factor β1 and receptors on human renal tubular epithelial cells

摘要:

目的 观察C反应蛋白(CRP)对肾小管上皮细胞Fcγ受体表达的影响,并探讨Fcγ受体在CRP诱导转化生长因子β1(TGFβ1)表达中的作用.方法 以CRP干预人肾小管上皮细胞株(HK-2细胞),实时定量PCR检测FcγRⅠ (CD64)、FcγRⅡa(CD32a)、FcγRⅢ(CD16)3种Fcγ受体mRNA表达.根据实验结果,采用流式细胞术和Western印迹法检测CD32a蛋白的表达.以抗CD32a抗体封闭CD32a受体,实时定量PCR检测TGFβ1 mRNA表达,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测TGFβ1蛋白和Ⅰ型胶原蛋白、Ⅳ型胶原蛋白的分泌水平.结果 HK-2细胞无CD64和CD16mRNA表达,有CD32a mRNA表达.CD32a mRNA表达呈剂量依赖性增高(P<0.01),CRP 10 mg/L刺激达到高峰.流式细胞术示CRP 10 mg/L刺激HK-2细胞24 h CD32a平均表达量为23.35%±7.43%,未刺激组为1.66%±0.28%,差异有统计学意义(P<0.01).Western印迹显示CRP以剂量依赖方式上调CD32a表达,CRP10 mg/L显著性上调CD32a表达(P<0.01).抗CD32a抗体封闭CD32a受体后,CRP作用减弱,TGFβ1 mRNA表达下调(P<0.01),TGFβ1、Ⅰ型胶原蛋白、Ⅳ型胶原蛋白的分泌下降(均P<0.05).结论 CRP刺激可上调肾小管上皮细胞表面的CD32a受体的表达,CRP通过肾小管上皮细胞CD32a受体介导促纤维化因子TGFβ1表达上调.

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