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共刺激分子CD40在格雷夫斯病甲状腺组织中的表达及其免疫病理学意义

Costimulatory molecule CD40 expression in thyroid tissue of Graves' disease patients and its immune pathogenetic significance

摘要:

目的 观察分析共刺激分子CD40在格雷夫斯病甲状腺组织中的表达及其免疫病理意义.方法 选取2008年1月至2010年12月南京医科大学附属苏州医院和苏州大学附属第三人民医院收治的甲状腺手术患者甲状腺组织8例,其中3例为格雷夫斯病,5例为非毒性甲状腺肿.运用免疫组织化学染色技术检测CD40分子在甲状腺组织中的表达;运用原代培养技术体外培养甲状腺滤泡细胞(TFC),分别加入细胞因子γ干扰素(IFN-γ)(IFN-γ刺激组)、白细胞介素(IL)-6(IL-6刺激组)或肿瘤坏死因子-α(TNF-α)(TNF-α刺激组)刺激,设不加细胞因子组为无刺激组,培养3d后,用流式细胞术检测各组TFC表面CD40分子的表达;加入激发型CD40单抗5C11(IFN-γ+CD40组)或小鼠IgG抗体(IFN-γ+mIgG组)与IFN-γ刺激组TFC共培养3d后,用噻唑蓝(MTT)法检测TFC的体外增殖;放免法检测各组TFC培养上清中游离三碘甲腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)和甲状腺球蛋白(Tg)的水平.结果 CD40分子表达于格雷夫斯病患者甲状腺组织中TFC表面,而在非毒性甲状腺肿TFC表面未见阳性表达.IFN-γ刺激组、IL-6刺激组、TNF-α刺激组原代培养TFC表面CD40分子的表达分别为86.4%±4.6%、90.0%±4.2%、87.3% ±4.2%,均显著高于无刺激组的23.7% ±7.3%(均P<0.01).IFN-γ+CD40组TFC增殖能力明显高于IFN-γ+mIgG组(1.14±0.14比0.75 ±0.06,P<0.01);IFN-γ+CD40组TFC培养上清中分泌的FT3、FT4和Tg分别为(1.10±0.15)、(0.80 ±0.14) pmol/L和(30.23±1.60) μg/L,均显著高于IFN-γ+ mIgG组的(0.76 ±0.07)、(0.63 ±0.09) pmol/L和(21.37±3.22)μg/L(均P<0.05).结论 共刺激分子CD40异常表达于格雷夫斯病患者甲状腺组织,其介导的共刺激信号可能参与了格雷夫斯病的免疫病理机制.

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